Q
Hoe te om samengestelde peptides te bewaren?
Peptides moeten over het algemeen vanaf licht voor opslag op lange termijn worden opgeslagen, en bij -20 graden moeten worden opgeslagen, en zouden kunnen bij 4 graden voor korte termijn worden opgeslagen. Kan bij kamertemperatuur voor korte perioden worden verscheept. Peptides zijn stabiel bij -20°C, vooral wanneer gevriesdroogd en opgeslagen in een droogmiddel. Gevriesdroogde peptides kunnen bij kamertemperatuur worden gehouden alvorens hen aan lucht bloot te stellen. Dit zal het effect van vochtigheid verminderen, en wanneer vorst drogen niet mogelijk is, is de beste benadering kleine werkende steekproeven op te slaan. Voor peptides die Ontmoete Cys, of TrP bevatten, deoxygenation is de buffer essentieel voor hun ontbinding, omdat dit peptide gemakkelijk door de lucht kan worden geoxydeerd, en stikstof of waterstofgas die langzaam door peptide vloeien alvorens de fles te verzegelen zal verminderen ook de oxydatie. Peptides die Jenever of Asn bevatten zijn ook naar voren gebogen aan degradatie, en al deze peptides hebben een beperkt leven in vergelijking met die zonder deze problematische eenvoud.
Q
Als mijn peptide zuivere 95% is, wat is andere 5%?
Peptide de zuiverheid wordt gewoonlijk bepaald door HPLC gebruikend een gradiënt van 1%-acetonitrile per minuut. Tijdens het syntheseprocédé, kan de het cross-linking efficiency tussen aminozuren 100% niet altijd bereiken, waarbij een reeks onzuiverheden met ontbrekende aminozuren wordt veroorzaakt. Het grootste deel van deze amino zuur-geschrapte onzuiverheden werden verwijderd tijdens reiniging, maar enkelen hadden chromatografische profielen die dicht op doelpeptide leken. Verontreinigende stofpeptides met deze aminozuurschrappingen die in de peptide steekproef blijven maken omhoog tot het blijven weinig percenten.
Q
Hoe worden peptides gezuiverd?
Peptide de reiniging gebruikt over het algemeen een reversed-phase kolom (zoals C8, C18, enz.), 214nm. Het buffersysteem is gewoonlijk oplosbare bevattende TFA, pH 2,0. Treed als buffer op voor A bevat 0,1% TFA in H2O, en de Buffer B bevat 1% TFA/ACN/pH2.0. Los met Buffer A op vóór reiniging; als de ontbinding niet goed is, los met Buffer B op en verdun dan met Buffer A; voor hoogst hydrophobic peptides, soms moeten een kleine hoeveelheid Mierezuur of het azijnzuur worden toegevoegd. HPLC analyse van ruwe peptide producten, als peptide niet lang (onder 15aa) is, zal er over het algemeen een hoofdpiek zijn, en de belangrijkste piek is gewoonlijk het product van gemiddelde lengte; voor lange peptides over 20aa, als er geen hoofdpiek is, moet HPLC met Massa worden gebruikt om het molecuulgewicht te bepalen, en dan te bepalen welke piek samen te stellen peptide is.
Q
Hoe zouden de einden van peptide moeten worden behandeld? Het vrij houd blokkeer of het?
Peptides worden gebruikt om proteïnen te simuleren. om de prestaties van proteïnen na te bootsen, moeten wij polypeptiden met gelijkaardige structuren en lasten aan proteïnen samenstellen. Wanneer peptide van een proteïne „wordt verwijderd“, zal het aantal lasten op beide einden van dat van de proteïne van het genlichaam verschillend zijn. Wij moeten de compositing strategie veranderen om hen verenigbaar te maken. In het algemeen: Als de opeenvolging van het c-Eindpunt van de proteïne is, bescherm het n-Eindpunt door acetylation; als het een opeenvolging van het n-Eindpunt van de proteïne is, bescherm het c-Eindpunt door amidation; als het van het middendeel van de proteïne is, gebruik acetylation en amidation wordt om de Beide einden te beschermen beschermd.
Q
Wat zijn de voordelen van pin-Gewijzigde peptides?
De wijziging van de polyethyleenglycol moet hoogte - moleculair polymeer (ethyleenglycol) aan de doelmolecule door het covalente plakken toevoegen. De wijziging van de polyethyleenglycol bedriegt het immuunsysteem van de gastheercel door het polypeptide te camoufleren, verbetert het therapeutische effect van het polypeptide, en verhoogt de oplosbaarheid en de biologische beschikbaarheid van hydrophobic drugs. Het kan de omloop van peptides ook verlengen door nierontruiming te verminderen.
Q
Wat zou de aandacht aan wanneer het introduceren van fluorescente wijziging in peptides moeten worden betaald?
Ks-V peptide stelt voor toevoegend linker tussen de polypeptidemolecule en de fluorescente wijziging, die het effect kunnen verminderen van de fluorescente wijziging op het vouwen van het polypeptide en de band aan de receptor. Nochtans, als het doel van fluorescentiewijziging de fluorescentiemigratie tussen andere structuren te kwantificeren is, wordt het geadviseerd om geen Linker te introduceren.
Q
Wat zou de aandacht aan wanneer het ontwerpen van phosphorylation-gewijzigde peptides moeten worden betaald?
Ks-V peptide adviseert dat wanneer het ontwerpen van phosphorylation wijzigingen, de phosphorylation wijziging niet 10 aminozuren van het n-Eindpunt zou moeten overschrijden om een daling van koppelingsefficiency te vermijden.
Q
Kunt u D-Peptide doen? Hoeveel types van D-Type natuurlijke aminozuren zijn er?
Kan. Er zijn 19 soorten D-Type natuurlijke aminozuren. Gly in natuurlijke aminozuren heeft geen chiral structuur, en kan de D-Type structuur van andere natuurlijke aminozuren in Keshengjing-peptide worden geselecteerd. Voor details, gelieve te openen aan de officiële website het programma om de lijst van speciale aminozuren te bekijken.
Q
Hoeveel phosphorylation plaatsen kan in peptide ks-v synthese worden omvat?
Over het algemeen, zijn er hoogstens drie, en het moet volgens de specifieke opeenvolging worden geanalyseerd.
Q
Waarom ondergaan de polypeptiden n-Eindacetylation en c-Eindamidationwijziging?
Dergelijke wijzigingen kunnen confer op de polypeptideopeenvolging de eigenschappen van de inheemse proteïne.