Wat is recombinant eiwit

Recombinant eiwit is een eiwit gecodeerd door het gemanipuleerde gen - Recombinant Gene en gegenereerd door het specifieke recombinant expressie systeem (zie proteïne expressie systemen).Het recombinant gen is een nieuwe genetische combinatie waarbij één of meer DNA-segmenten of genen zijn ingevoegd uit een ander molecuul of uit andere soortenIn vergelijking met natuurlijke eiwitten kan recombinant eiwit relatief gemakkelijk in grote hoeveelheden worden geproduceerd.

Recombinant eiwit speelt een belangrijke rol bij het bestuderen van biologische processen zoals cytokines en groeifaktoren, enzymen en kinasen en functies van het complementair systeem.recombinante eiwitten staan bekend als zeer krachtige geneesmiddelen die veilig zijn voor bijwerkingen buiten het doel., hebben een kortere tijd om zich te ontwikkelen dan kleine moleculen (zie recombinant proteïne geneesmiddelen).

Hoe recombinant eiwit wordt gemaakt

Om recombinante eiwitten te maken, wordt het gen geïsoleerd en gekloond tot een expressievector.eiwitzuiveringssysteem en eiwitidentificatiesysteem.

Basisstappen om recombinant Protein te krijgen:
1- Amplificatie van het gen van belang.
2Inbrengen in de kloningsvector.
3Subklonen in een expressievector.
4Transformatie in eiwit-expresserende gastheer (bacterie (E coli), gist, zoogdiercellen of baculovirus-insectencelstelsel).
5Test voor de identificatie van recombinant eiwit.
6Grootschalige productie.
7Isolatie en zuivering.

Isolatie van eiwitten

Aangezien de chemische en fysische eigenschappen van eiwitten verschillen, kunnen ze met behulp van verschillende veelgebruikte methoden voor latere analyse van elkaar worden geïsoleerd:

Centrifugatie  De massa en vorm van een eiwit geven hem een specifieke snelheid van sedimentatie onder hoge g-krachten, waardoor scheiding mogelijk is
Gel-elektroforese: polypeptide ketens met verschillende moleculaire gewichten migreren met verschillende snelheden door een gelmatrix (zoals polyacrylamide) wanneer een elektrisch veld wordt aangebracht
Vloeibare chromatografie: eiwitten worden gescheiden op basis van hun beweging door een kolom met bolvormige kralen.lading (ion-uitwisselingskolom) en ligandbindend gedrag (affiniteitskolom)